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                臭氧消毒柜的消毒灭菌试验

                时间:2020-11-27 来源:本站 点击:59次

                臭氧消毒柜灭菌试验

                一、背景

                臭氧能迅速弥漫,无灭菌死角,优于传统的灭菌消毒方法,并能很快自行分解为氧气或单 个氧原子,无有毒残留物。臭氧已广泛用于水处理、空气净化、食品加工、医疗、医药、水产养殖等领域。臭氧是一种强氧化剂,灭菌过程有以下 3 种形式:1.臭氧能氧化分解细菌内部葡萄糖所需的酶,使细菌灭活死亡。2.直接与细菌、病毒作用,破坏它们的细胞器和 DNA、RNA,使细菌的新陈代谢受到破坏,导致细菌死亡。3.透过细胞膜组织,侵入细胞内,作用于外膜的脂蛋白和内部的脂多糖,使细菌发生通透性畸变而溶解死亡。本实验以三种常见高浓度细菌,分别置于高臭氧浓度进行全部杀灭效果观察,以确定两种模式:1、7000ppm浓度臭氧杀菌效果;2、7000ppm浓度臭氧+酒精消毒组合方式杀菌效果。

                二、 实验目的:

                1、 臭氧具有非常广谱的杀菌效果,本实验以设定高浓度条件下臭氧浓度对三种常用标准菌:大肠杆菌、 枯草芽孢杆菌、白色念珠菌进行杀灭实验,验证当臭氧浓度大于7000ppm 时能否绝对杀灭上述三种高浓度的微生物。

                2、 臭氧和酒精消毒杀灭菌种谱系不同,本实验采用臭氧浓度大于7000ppm消毒1小时后,再喷洒酒精方式消毒,验证此方案能否绝对杀灭上述三种高浓度的微生物。

                3、 通过本试验验证南京康善制药设备有限公司生产臭氧消毒柜能否达到灭菌效果。

                三、试验方案:

                1、 领取生产用透析桶蓝色瓶盖9000个,红色瓶盖36个。

                2、 检测方法:

                ⑴ 菌种准备:标准菌株大肠杆菌 C3000 扩大培养稀释至浓度 8*108/ml、枯草芽孢杆菌 6350扩大培养稀释至浓度:20*108/ml、白色念珠菌 98001 扩大培养稀释至浓度 4.5*106/ml。

                ⑵ 菌种接种:用棉签蘸取每种细菌液涂布于红色瓶盖内垫表面,每种盖涂布3个共9个瓶盖;剩余3红色瓶盖不涂布任何细菌液,留做对照样品。

                ⑶ 培养皿准备:市售营养琼脂培养基及玫瑰红培养基,按照使用说明,无菌条件下制备平皿,每皿 12-15ml。

                ⑷ 两次式样:将12个瓶盖置于物料转筒中,分别采取两种灭菌方式进行灭菌①臭氧浓度达到浓度后,持续消毒1h;②在规定浓度臭氧下消毒1h,再用75%酒精喷淋10min消毒。

                ⑸ 样品取样:用消毒后物料钳挑出红色瓶盖,用棉签签蘸取表面用于培养基上。用浸有无菌生理盐水的采样棉拭子,横、竖往返各涂擦桶盖内侧面5次,并随之转动棉拭子,剪去采样人手触及的部分,将棉拭子放人装有10ml采样液的试管中送检。取样应在洁净取样车中进行。

                ⑹ 细菌培养C3000 和 63501的细菌液,用棉签蘸起均匀涂布接种于营养琼脂培养基上,98001 涂布于玫瑰红钠琼脂培养基上。98001 放置于 22-25℃培养 72 小时;C3000 及 63501 放置于 35℃培养 48 小时进行结果判定。

                (7)结果观察 经过培养 35℃和 22-25℃培养 48 小时后对上述灭菌培养基进行菌落生长情况观察,以确定不同臭氧浓度的灭菌效果,结果如下: 1、非灭菌培养基对照成立。 2、各臭氧浓度灭菌效果见下列表格,其中“+”为细菌培养阳性、“-”为细菌培养阴性。记录于以下表格一、表格二中。

                 

                 表格一 :臭氧灭菌结果

                菌种

                阳性对照

                样品编号

                杀菌效果

                C3000

                样品Y1

                样品A1


                样品Y2

                样品A2


                样品Y3

                样品A3



                样品A4



                样品A5



                样品A6


                63501

                样品Y4

                样品A7


                样品Y5

                样品A8


                样品Y6

                样品A9



                样品A10



                样品A11



                样品A12


                98001

                样品Y7

                样品A13


                样品Y8

                样品A14


                样品Y9

                样品A15



                样品A16



                样品A17



                样品A18


                无菌种

                样品Y10(阴性对照)



                无菌种

                样品Y11(阴性对照)



                无菌种

                样品Y12(阴性对照)



                        表格二:臭氧灭菌+酒精消毒灭菌结果

                菌种

                阴性对照

                样品编号

                杀菌效果

                C3000


                样品B1



                样品B2



                样品B3



                样品B4



                样品B5



                样品B6


                63501


                样品B7



                样品B8



                样品B9



                样品B10



                样品B11



                样品B12


                98001


                样品B13



                样品B14



                样品B15



                样品B16



                样品B17



                样品B18


                无菌种

                样品Y13



                无菌种

                样品Y14



                无菌种

                样品Y15



                 




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